Забор материала для гистологического исследования
Гистологическое исследование
По данным Всемирной организации здравоохранения, ежегодно в мире диагностируют 10 млн новых случаев рака (в России – 0,5 млн). Важную роль в лечении занимает своевременность обращения к врачу и качество диагностических исследований. К наиболее важным и информативным методам диагностики рака относится гистология опухоли. Экспертное исследование в условиях лаборатории с новейшим оборудованием позволяет поставить точный, объективный диагноз и составить эффективную программу лечения.
Что представляет собой гистологическое исследование
Гистологическая диагностика обязательно входит в программу обследования пациентов с подозрением на онкологию перед операцией, химиотерапией, лучевой терапией. Данный вид исследования предполагает непосредственное изучение тканей новообразования для подтверждения или опровержения онкологического диагноза. Забор тканей осуществляют из внутренних органов и тканей пациента в очаге поражения. Затем биообразцы обрабатывают и изучают в лаборатории под микроскопом.
Метод дает возможность:
- выявить рак на ранней стадии, а также метастазы;
- определить нарушение функций, структуры исследуемых тканей;
- правильно выбрать комбинацию методов лечения, технику операции.
Его применяют при онкозаболеваниях органов ЖКТ, кожи и мягких тканей, молочной и щитовидной желез, органов грудной клетки, а также при онкоурологических, онкогинекологических болезнях.
Зачастую гистологические исследования тканей дополняют цитологической диагностикой, в ходе которой врачи изучают отклонения в структуре и функциях клеток. В ряде случаев для проведения цитологии достаточно взять мазок (например, с тканей матки), смыв или образец жидкости. Гистологический же метод связан с необходимостью забора биоматериала из внутренних органов.
В каких случаях проводят гистологическое исследование материала
Гистологию проводят в случаях, когда необходимо:
- подтвердить или опровергнуть поставленный диагноз, особенно если ситуация спорная;
- провести дифференциальную диагностику для разграничения схожих болезней;
- уточнить наличие злокачественной опухоли на ранней стадии;
- изучить динамику развития новообразования (увеличение, разрастание);
- проанализировать результаты и оценить эффективность текущего лечения;
- спланировать проведение операции по удалению опухоли;
- определить злокачественность тканей непосредственно в ходе операции для принятия решения об удалении или сохранении части органа.
Заменить гистологическое исследование другими методами невозможно. Его могут назначать в комплексе с обзорной и контрастной рентгенографией, УЗИ с допплерографией, МРТ и КТ, эндоскопическим исследованием, радионуклидной диагностикой, а также лабораторными анализами.
Хотите мы вам перезвоним?
Методы гистологического исследования
Основной метод забора биоматериала из внутренних органов – биопсия. Ее проводят несколькими методами.
- Пункционный. Распространенный метод для получения биообразцов тканей печени, простаты, молочных желез. Заключается во введении в орган тонкой биопсийной иглы.
- Щипковый. Используют микроскопические щипцы, которые вводят эндоскопическим методом (бронхоскопия, колоноскопия, гастроскопия). Применяют при опухолях кишечника, пищевода, желудка, органов дыхания.
- Аспирационный. Посредством тонкой трубочки отсасывают секреторную жидкость желез, миоматозных узлов матки.
- Кюретаж. Применяют при исследовании полостей. Биоматериал соскабливают с поверхности посредством ложечки – кюреты.
- Мазок. Используется для диагностики опухолей, расположенных на слизистых оболочках. Забор проводят миниатюрной щеткой.
- Эксцизионный и инцизионный. Хирургическими инструментами иссекают часть или всю опухоль с последующим исследованием.
Специальной подготовки к гистологии не требуется. Забор биоматериала проводят натощак, чаще всего утром. Процедура проходит под местным наркозом, поэтому не вызывает болезненных ощущений. Если новообразование расположено в кожных покровах, достаточно седативных (успокаивающих) средств.
Все методы биопсии абсолютно безопасны для организма и связаны с минимальным травматизмом. Проводят процедуру под визуальным контролем врача посредством УЗИ, что исключает риск повредить органы.
Преимуществом биопсии является минимальное количество противопоказаний. К ним относят проблемы со свертываемостью крови, аллергическую реакцию на анестетики, сердечную недостаточность высокой степени тяжести. Женщинам не проводят процедуру в случаях, если она угрожает беременности.
Как проходит исследование
Лабораторное гистологическое исследование биопсийного материала проводят традиционным и ускоренным способом. Традиционно биоматериал проходит специальную обработку для сохранения формы. Его уплотняют и нарезают на пластины толщиной в несколько микронов для исследования под микроскопом. Результат можно получить в течение 7–10 дней.
Ускоренный способ применяют в случаях, когда биопсию проводят во время операции. Онкохирургу нужен результат исследования, чтобы определить – сохранять ткани или удалять их. В этом случае биообразец в течение 1 часа замораживают, разделяют и микроскопируют.
В онкологии применяют несколько видов микроскопирования:
- световое – изучение биообразца в видимой части спектра;
- ультрафиолетовое – изучение в ультрафиолетовой части спектра;
- электронное – исследование под направленным пучком электронов;
- флуоресцентное – исследование при флуоресцентном освещении после предварительного окрашивания биообразца;
- интерференционное – определение концентрации и количественных показателей вещества в клетках;
- цитоспектрофотометрию – исследование химического состава;
- радиоавтографию – изотопную оценку активности обменных процессов.
В заключении специалист подробно описывает свойства всех видов тканей, которые были обнаружены в биообразце. Расшифровать результаты гистологии может только квалифицированный врач-онколог.
Возможны ли ошибки при исследовании?
Есть 4 основных условия, которые могут повлиять на результаты гистологии.
- Врач, который проводит биопсию, должен сделать прицельный забор образца пораженной ткани с максимальной точностью – непосредственно из опухоли. Для этого применяют новейшие УЗИ-аппараты, позволяющие врачу визуально контролировать свои действия.
- Хранение и препарирование биообразцов должно соответствовать медицинским нормам. В идеале образец хранят так, чтобы его можно было использовать для повторного исследования.
- Само исследование должен проводить специалист с высокой квалификацией и многолетним опытом.
- Исследовательское оборудование должно быть высокого класса и обладать широким спектром технических возможностей.
Если все условия соблюдены, то риск ошибки сводится к нулю.
Где пройти гистологическую диагностику
Данное исследование можно пройти в онкологическом центре «СМ-Клиника» в условиях стационара или амбулаторно.
- Безопасные и безболезненные методы забора материала, индивидуальный подбор анестезии.
- Онкологи, гистологи, диагносты с высокой квалификацией и опытом от 10 лет.
- Собственная лаборатория с оборудованием, соответствующим мировым стандартам.
- Высокоточные световые и электронные микроскопы.
- Полный комплекс диагностики онкологических заболеваний на любой стадии.
Как проводится гистологическое исследование: виды, методы, особенности
О том, как проходят гистологические исследования, какие задачи кроме диагностических они позволяют решать, что влияет на сроки их выполнения рассказывает заведующая патологоанатомическим отделением с прозектурой НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова, к.м.н. Анна Сергеевна Артемьева.
Что служит материалом для патоморфологических (гистологических) исследований?
Кусочек ткани пациента: кожи, слизистых оболочек, внутренних органов, костей, головного и спинного мозга и т.п., так называемый биоптат.- Пункционная биопсия – «тычок», тонкой или толстой иглой. Пункционные биоптаты редко имеют диаметр больше 1-2 мм.
- Ножевая биопсия – открытая или эндоскопическая (малоинвазивная), в том числе лапароторако-медиастиноскопия.
Биопсию внутренних органов делают под УЗИ-навигацией, либо с помощью хирургического вмешательства.
Операционный материал – это все что удалено во время операции, как правило, орган или его часть, или несколько органов и/или их частей с образованием (опухолью) или без него.Как обрабатывают эти материалы для проведения гистологического исследования?
Фиксация биоптата может занимать от 6 до 24 часов – в зависимости от его вида и размера.
Операционный материал фиксируется дольше, в несколько этапов. Сначала предварительная фиксация, которая занимает примерно 12 часов. Затем вырезка нужных фрагментов и повторная фиксация еще 24 часа.
Соотношение объема материала к объему формалина должно быть 1:20.
Время фиксации сократить нельзя!В качестве растворов применяются: абсолютированный изопропиловый спирт (6-8 смен), ксилол (2 смены), расплавленный парафин (2 смены).
Программа разнится для «жирного» материала (к которым относятся, например, ткани молочной железы) и «нежирного» – 36 и 24 часа соответственно.
Процесс получения парафиновых блоков.
3 Этап. Изготовление парафинового блока. Кусок материала помещается в форму с расплавленным парафином (уже другим нежели во время процессинга – с более высокой температурой плавления) и охлаждается. Выполняется вручную, сложно ускорить.
Срезы монтируются на стекла и должны высохнуть.
Для чего делаются срезы?
Срезы делаются для рутинной окраски гематоксилинном и эозином, иммуногистохимического исследования и других видов исследований.
Срезы для всех исследований используются одинаковые, различается окраска, могут отличаться стекла, на которые они монтируются, так для ИГХ и FISH нужны специальные адгезивные стекла или заряженные стекла.
Блоки и стекла способны храниться долгие годы и использоваться для проведения дополнительных гистологических исследований, пересмотров, а также в научных целях.
Какие виды гистологических исследований наиболее информативны?
- Гистологическое исследование
- Иммуногистохимия (ИГХ)
- Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH), может быть хромофобной (принцип тот же, другой тип метки)
Что позволяют определить разные виды гистологических исследований
Гистологическое исследование – что это такое?
Позволяет верифицировать опухоль – то есть определить из каких клеток она состоит (из какой ткани она развивается), степень ее дифференцировки (зрелости).
Рутинная окраска, выполняющаяся при гистологическом исследовании, позволяет выявить патологический процесс в анализируемом материале (биоптате, операционном материале):
- воспаление,
- специфическое воспаление,
- аномалия развития,
- опухоль.
Также, в большинстве случаев, благодаря рутинной окраске, можно определить степень злокачественности опухоли и, если она достаточно зрелая, то какова ее природа.
Окрашенные срезы под микроскопом
Инвазивный протоковый рак er 100%.
Карцинома сигмовидной кишки.
Крупноклеточная нейроэндокринная опухоль.
МТС крупноклеточной нейроэндокринной опухоли.
Неспецифический рак молочной железы. Участок in situ карциномы внутри протока, криброзного типа.
Низкодифферинцированный рак пищевода.
При гистологическом исследовании биоптата и операционного материала можно оценить распространенность: размер опухоли и прорастание в окружающие ткани, насколько затронуты лимфоузлы и есть ли метастазы в отдаленные органы (если эти все структуры присланы для гистологического исследования). При консультации готовых микропрепаратов – стекол, это, как правило, невозможно, если опухоль больше размеров гистологической кассеты или рассечена предыдущим исследователем и не предоставлены данные макроскопического исследования.
Сроки выполнения гистологического исследования зависят от количества микропрепаратов и от категории сложности того процесса, который в них обнаруживается, сроки могут удлиняться, особенно при необходимости использования дополнительных методов исследования и анализа дополнительных сведений. На сроки выполнения гистологического исследования влияет полнота предоставленной пациентом клинической информации, в том числе данных уже проведенных исследований.
Иммуногистохимия (ИГХ)
Сложное многоэтапное исследование, выполняется после гистологического исследования на том же материале. Опухолевые срезы окрашиваются антителами, которые способны связываться антигенами (белками), которые несут опухолевые клетки. Разные опухолевые клетки несут разные антигены, к каждому из которых подобно ключа к замку подходит антитело.
Один из этапов ИГХ
ИГХ исследование — это комбинаторика. 100% специфичных и чувствительных к какой-то опухоли маркеров не существует, но есть набор антигенов, которые в определенном типе опухоль должны быть и набор тех, которых там быть не должно, таким образом ИГХ-панель строится так чтобы включать несколько антител, которые должны быть позитивны и несколько, которые должны быть негативны. Для разных опухолей различаются эти наборы позитивных/негативных маркеров.
При проведении прогностической ИГХ – выявлении маркеров чувствительности к терапии определяется набор таких маркеров для конкретных опухолей, например, рака молочной железы: рецепторы стероидных гормонов (эстроген, прогестерон), рецептор эпидермального фактора роста (HER2) и индекс пролиферативной активности Ki67 (скорости деления клеток).
Таким образом, каждое антитело наносится на отдельный срез ткани, монтированный на отдельное стекло, как правило с соответствующим внешним контролем, количество реакций (используемых антител) и этапов окраски может существенно варьировать в зависимости от конкретной диагностической ситуации, все зависит от индивидуальных особенностей опухоли. Проводится такое количество окрасок, которое необходимо для того, чтобы выявить наиболее характерный для определенной опухоли набор позитивных и негативных маркеров.
Кому-то для этого будет достаточно 5 антител, а кому-то необходимо сделать 20 окрасок и более. Максимальное количество окрасок, которое нам приходилось делать – 212.
Поэтому точные сроки и стоимость этого исследования невозможно определить заранее. Разные по течению и прогнозу опухоли могут быть очень похожи друг на друга, только минимальные различия в окрашивании, с учетом клинических данных и данных других методов обследования, могут позволить установить верный диагноз.
Есть целый ряд доброкачественных опухолей, симулирующих злокачественные, в том числе высокоагрессивные, а некоторые злокачественные высоко дифференцированные опухоли трудно отличить от воспалительных и реактивных процессов. В таких ситуациях только опыт и квалификация патоморфолога, анализ всего комплекса доступной информации (снимки КТ, МРТ, рентген, протокол операции, и др.) позволяют поставить диагноз.
В грамотной интерпретации результатов ИГХ очень важна роль эксперта, ведь те случаи, с которыми приходится работать, в большинстве своем, сложные. Практически не существует антител, которые могут выступать в качестве 100%-х маркеров той или иной опухоли, врачу всегда приходится взвешивать различные вероятности.
Что определяется с помощью ИГХ?
Иммуногистохимия позволяет оценить потенциальный темп роста опухоли, ответ на химио-, таргетную, гормональную терапию.
Флуоресцентная гибридизация in situ (FISH-тест)
Это метод молекулярно-генетической диагностики в ткани.
FISH проводится в срезе ткани и позволяет привязать генетическую перестройку к конкретной опухолевой клетке.
В этом тесте также используются специальные красители, которые связываются только с определенными участками хромосом. Их называют зондами, которые могут быть помечены флуоресцентным или хромогенным красителем, визуализирующимися при помощи флуоресцентного или светового микроскопа.
Технические операции по подготовке гистологических стекол к этому исследованию занимает 2 рабочих дня.
Анализ препарата с помощью многоголового микроскопа.
Полученные микропрепараты очень чувствительны к внешней среде – они могут выцвести со временем, чтобы избежать потерь информации все FISH-препараты сканируются, создается их цифровая копия, которая доступна для внешнего пересмотра. Специалисты просматривают флуоресцирующий материал в темном поле, в анализе препарата принимают участие как минимум 2 специалиста. При необходимости используется и цифровой анализ.
Что определяется с помощью FISH-теста?
FISH-тест позволят диагностировать некоторые виды опухолей, определяет целесообразность использования некоторых химиотерапевтических препаратов.
- определяется наличие амплификации HER2 в случаях пограничного результата по данным ИГХ, что необходимо для назначения таргетной терапии;
- проводится диагностика, то есть выявление генетических перестроек специфичных для определенного типа опухолей, когда невозможно окончательно установить диагноз при помощи более простых методик, чаще всего это саркомы мягких тканей и опухоли головного мозга;
- генетические отклонения, вызывающие рак того или иного органа;
- при лимфомах эта методика используется в диагностических целях и для выявления факторов неблагоприятного прогноза, то есть показаний для ранней интенсификации лечения.
За год патологоанатомическое отделение НМИЦ онкологии имени Н.Н. Петрова выполняет около 20000 гистологических исследований (пациентов), из них около 5000 консультативных случаев (пересмотров), более 30000 ИГХ исследований, а также участвует в программе внешнего контроля качества ИГХ исследований NordIQ.
Специалисты отделения обладают огромным опытом проведения гистологических исследований и экспертными компетенциями.
Помните! Гистологические исследования – это отправная точка, от того насколько грамотно они выполнены зависит точность поставленного диагноза и эффективность назначенного лечения.Скорость выполнения гистологических исследований и адекватность гистологического заключения зависят от ряда факторов:
После выполнения гистологического исследования пациент получает гистологическое заключение/протокол исследования гистологического материала.
Расшифровка гистологического исследования: на что обратить внимание?
Гистологическое заключение включает в себя несколько рубрик (полей):
Макроскопическое описание
Микроскопическое описание
Описание изменений на микроскопическом уровне, не обязательно к заполнению, так как вся необходимая информация может быть отражена в поле «заключение».
Результаты иммуногистохимического исследования
В этом поле описано какие антитела использовались в данном случае и каков результат окрашивания: наличие окрашивание или его отсутствие, локализация в клетке при необходимости, а также процент позитивных клеток и интенсивность реакции, когда это имеет значение.
Патологоанатомическое заключение
Содержит нозологическую/классификационную единицу, если ее возможно установить по исследованному материалу, то есть дает ответы на вопросы:
- Это первичная опухоль или метастаз?
- Где локализован первичный опухолевый очаг?
- Каков гистологический тип опухоли (из клеток какого типа она состоит).
Также приводятся все необходимые прогностические данные: степень дифференцировки, параметры, влияющие на стадию, состояние краев резекции, если возможно их оценить и т.п.
Дополнительные замечания и рекомендации
Поле может содержать комментарии, относительно возможного направления дальнейшего обследования, вероятности того или иного диагноза, необходимости ознакомиться с теми или иными клиническими данными и др.
Мы не рекомендуем пациентам самостоятельно заниматься расшифровкой показателей гистологического исследования, используя информацию, полученную на различных Интернет-сайтах и форумах пациентов, так как на интерпретацию данных влияет большое количество факторов, в том числе, возраст пациента, данные других исследований и др.
Расшифровкой исследования может заниматься только специалист – врач онколог по профилю заболевания!
Авторская публикация:
АРТЕМЬЕВА АННА СЕРГЕЕВНА
заведующий патологоанатомического отделения с прозектурой ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, кандидат медицинских наук
Гистологическое исследование: когда оно назначается, как проводится и что показывает
Частные лаборатории оказывают услугу просмотра гистологического препарата, стоимость которой в среднем составляет 3000–4000 рублей.
Во многих частных лабораториях могут провести гистологическое исследование препарата пункционной биопсии печени.
Для проведения морфологического (гистологического) исследования препарата кожи необходимо сдать биоптат.
Контроль качества лабораторных исследований, осуществляемый по международным стандартам, — дополнительная гарантия точности результатов анализов.
Некоторые медицинские лаборатории предлагают своим клиентам в числе прочих услуг бесплатные консультации врача-специалиста.
Существенно сэкономить на медицинском обследовании помогут акции и специальные предложения.
Гистологическое исследование биопсийного материала — один из основных методов лабораторной диагностики новообразований. Это высокоточный способ, позволяющий оценить состояние и структуру клеток, поставить верный диагноз и проконтролировать эффективность терапии.
Что собой представляет гистологическое исследование
Гистологическое исследование — это изучение клеток биоптата (образца пораженной ткани) под микроскопом. Звучит достаточно просто, однако на самом деле метод этот довольно сложный, он предполагает различные технологии обработки биоматериала и различные способы микроскопии.
Биоматериалом для гистологического исследования могут быть образцы различных тканей — кожи, слизистых оболочек, мышц. Иногда гистологическому исследованию подвергается мазок — клетки эпителия, снятые при помощи специальной мягкой щеточки.
Интересный фактПервые шаги в развитии гистологии были предприняты еще врачами античности и средних веков. Большое внимание изучению тканей уделяли такие светила медицины прошлого, как Авиценна и Везалий. Однако изучение тканей на клеточном уровне стало возможным лишь в 17 веке, после того как был изобретен первый микроскоп.
Методы проведения анализа
Методы гистологического исследования различаются по способу микроскопии. Выбор обычно определяется целями исследования: нужно ли качественное или количественное определение, выявление химического состава или внешних патологий структур…
Среди применяемых подходов можно выделить следующие методы микроскопии:
- Световая — просвечивание в видимой части спектра.
- Фазово-контрастная, позволяющая изучать клетки без окрашивания. Разновидностью этого метода является темнопольная микроскопия, дающая негативное изображение.
- Интерференционная микроскопия, которая дает возможность определять концентрацию вещества в клетке и проводить количественные морфологические измерения.
- Поляризационная, позволяющая определять характер расположения молекул в клетке.
- Люминесцентная (флуоресцентная), при которой клетки окрашиваются специальными красителями, заставляющими их светиться во флуоресцентном освещении.
- Ультрафиолетовая — просвечивание в ультрафиолетовой части спектра.
- Электронная, при которой для просвечивания используется не свет, а направленный пучок электронов.
- Радиоавтография — исследование, предполагающее использование изотопных меток, позволяет оценить скорость обменных процессов в клетке.
- Цитоспектрофотометрия — изучение химического состава клетки [1] .
Показания к назначению исследования
Когда показано проведение гистологического исследования? Этот метод диагностики используется во многих областях медицины. Особенно ценен этот метод при изучении новообразований — он позволяет определить их характер (доброкачественный или злокачественный), скорость роста, результативность терапии. Гистологические исследования широко используются в таких разделах медицины, как гастроэнтерология, оториноларингология, гинекология, урология, гематология, пульмонология, нефрология и других. Гистологическое исследование обязательно назначается при подозрении на опухоль, а также для определения стадии процесса. Его проводят перед назначением противоопухолевой терапии и во время лечения для контроля его эффективности (а также при необходимости — его коррекции).
Противопоказаний у метода практически нет — главное, чтобы была возможность взять биоптат. Ограничениями для проведения гистологического исследования могут стать нарушения свертываемости крови и аллергия на анестетики (эти факторы не позволят провести биопсию), тромбоцитопения, риск прерывания беременности, если исследование проводят женщине, ожидающей ребенка, а также некоторые заболевания, в частности, сердечная недостаточность [2] .
Как проводится гистологическое исследование: этапы процедуры
Гистологическое исследование подразделяется на несколько этапов.
Подготовка к исследованию
Зависит от способа и локализации места забора биоптата. Обычно эту процедуру проводят утром. Желательно проводить ее натощак, поскольку нередко биопсия предполагает местный наркоз или седацию. Поэтому последний прием пищи должен состояться за 8 часов до процедуры или раньше.
Взятие материала для гистологического исследования (биопсия)
Забор биоптата может производиться различными способами.
- Во время хирургической операции (так называемая инцизионная биопсия) врач берет образец пораженной ткани.
- Щипковая биопсия — забор частички материала специальными щипчиками, которые нередко вводятся эндоскопическим методом.
- Пункционная биопсия предполагает забор материала толстой иглой. Часто используется для получения образца клеток из печени и простаты.
- Аспирационная биопсия — образец тканей получают при помощи отсасывания маленькой трубкой, этот способ используют для биопсии миоматозных узлов, узлов щитовидной железы и пр.
- Эксцизионная биопсия — хирургическое удаление пораженных органов и тканей и их последующее исследование.
- Трепан-биопсия применяется для забора жидкостей из костной ткани.
- Кюретаж — соскабливание небольшого количества ткани из полости при помощи специальной ложечки-кюреты с острыми краями.
- Мазок — забор клеток слизистых оболочек тонкой щеткой, похожей на щетку туши для глаз.
Забор биоптата — безопасная процедура, которая проводится под контролем УЗИ, риска повреждения органов нет.
Исследование материала
В современной медицине используются два способа проведения гистологического исследования.
При обычном способе полученный биоптат обрабатывают фиксирующим веществом, которое не дает ему распадаться под воздействием ферментов, и уплотняют, заливая парафином. Затем полученный препарат нарезают микротомом на «ломтики» толщиной не более 8 мкм и окрашивают. После этого препарат изучают при помощи микроскопа и выносят заключение. Обычно результаты готовы через 7–10 дней. Дольше всего приходится ждать результатов обследования биоптата костной ткани — около 2 недель.
Однако иногда результаты гистологического исследования нужны врачу немедленно, в течение часа — например, при проведении операции, когда встает вопрос о немедленном удалении или сохранении органа. В этом случае применяется ускоренная методика гистологического исследования, при которой биоптат замораживают, режут микротомом и сразу проводят микроскопию. Исследование занимает всего час или менее [3] .
На заметкуНередко для гистологического исследования берется биоптат, расположенный на границе здоровой и пораженной областей.
Что показывает гистологическое исследование: принципы трактовки результатов
Гистологическое исследование — очень точный метод лабораторной диагностики. Ошибки крайне редки и вызваны в основном нарушением технологии при заборе биоматериала.
Как расшифровать результаты гистологического исследования? Сразу стоит оговориться, что результат, который выдается пациенту на руки, — медицинский документ, и только врач может интерпретировать его. Мы приводим лишь общую информацию об этом документе. Не пытайтесь на ее основании самостоятельно поставить себе диагноз и тем более назначить лечение.
В бланке результатов гистологического исследования всегда указывается имя пациента и его данные, дата и место забора биоматериала, тип исследованных тканей, способ исследования и растворы и препараты, которые применялись во время подготовки образца тканей.
Пациентов нередко тревожит объем заключения гистологического исследования. Обычно в заключении перечисляется огромное количество названий тканей, однако это еще не значит, что исследование обнаружило массу патологий. По правилам заключения специалист описывает вообще все типы тканей, обнаруженных в биоптате, даже если они совершенно здоровы.
Каждый тип тканей оценивается по нескольким параметрам — цвет, консистенция и плотность, наличие изменений, не вписывающихся в норму (таких, как прорастание, размягчение и пр.).
Стоимость исследования
Несмотря на всю сложность, гистологическое исследование стоит относительно недорого. В муниципальных медучреждениях при наличии полиса его делают бесплатно. Однако государственные лаборатории часто перегружены, и пациенту порой приходится долго ждать направления на биопсию и результатов анализа. Поэтому некоторые предпочитают заплатить из собственного кармана, но пройти исследование быстро. В коммерческих лабораториях стоимость гистологического исследования составляет около 3000–4000 рублей. Стоимость биопсии как таковой начинается от 1500–2000 рублей и может доходить до 8000 рублей в зависимости от сложности, способа проведения и типа биоматериала.
Гистологическое исследование требует строжайшего соблюдения технологии забора биоптата, его упаковки и перевозки. Это особенно важно, если транспортировка биоматериала от места забора до лаборатории будет долгой. Поэтому желательно, чтобы забор и исследование материала проходили в одном и том же месте (если есть такая возможность), в лаборатории, оснащенной самым современным оборудованием.
Гистологическое исследование
Гистологическое исследование, по сути, является методом диагностики заболевания на тканевом уровне — исследование врачом-патологоанатомом под микроскопом специально подготовленного участка патологической ткани позволяет получить представление о сути и выраженности патологического процесса, выявить его особенности и благодаря этому точно поставить диагноз и подобрать требуемое лечение. В онкологии гистологическое исследование играет роль «третейского судьи» — только заключение патологоанатома о наличии патологических клеток даёт право клиницисту поставить диагноз «рак». Гистологическое исследование широко применяется практически во всех медицинских специальностях и всегда выполняется после любой операции, но именно в онкологии оно имеет особое значение.
Как получают материал для гистологического исследования?
Процесс получения фрагмента ткани для гистологического исследования называется биопсия. Выделяют следующие виды биопсии:
- Кор-биопсия. Выполняется специальной иглой и автоматическим биопсийным пистолетом.
- Аспирационная биопсия. Применяется для забора жидкостного содержимого образований, например, кист или плевральной полости.
- Тонкоигольная аспирационная биопсия. Подвид аспирационной биопсии, материал забирается с помощью шприца и специальной иглы с заостренным или фестончатым краем. При таком методе возможно получить для исследования не только жидкостное содержимое, но и кусочек ткани.
- Аспирационно-режущая биопсия. При этом методе одной иглой берутся и фрагменты ткани, и клеточный материал для исследования.
- Трепанбиопсия. Забор производится трепаном — инструментом, представляющим собой полую трубку с заострённым концом. Применяется для взятия биопсии из костной ткани.
- Эксцизионная биопсия. Подразумевает удаление всего патологического образования (например, опухолевого узла) целиком. Наглядным примером эксцизионной биопсии является удаление увеличенного лимфатического узла при подозрении на лимфому.
- Скарификационная биопсия. Забор выполняется путём срезания тонкого пласта ткани, широко применяется для исследования новообразований кожи.
- Щипковая биопсия. Выполняется специальными биопсийными щипцами, часто применяется при заболеваниях желудочно-кишечного тракта.
- Браш-биопсия. Материал для исследования забирается с помощью специальной щёточки путём его соскабливания — например, со стенки бронха.
- Петлевая биопсия. Забор гистологического материала производится петлей одновременно с работой коагулятора. Применяется в отоларингологии, гинекологии.
- Отпечаток. Применяется при необходимости исследования отделяемого из эрозии или язвы — предметное стекло прикладывается к изъязвленной поверхности.
- Мазок-отпечаток. Материал для исследования снимается скальпелем, шпателем или специальной щёточкой и переносится на предметное стекло.
Как выполняется биопсия?
Биопсия проводится обычно под местной анестезией, в случае, если образование располагается достаточно глубоко — под контролем УЗИ или рентгена. От пациента не требуется какой-либо специфической подготовки (кроме, пожалуй, психологического настроя). Время процедуры не ограничено — если выполняется скарификационная биопсия или мазок-отпечаток, то требуется буквально несколько минут, а если речь идёт о биопсии глубоко расположенного образования, особенно вблизи крупных сосудов или нервов, то времени требуется значительно дольше.
В процессе выполнения биопсии иглу проводят к образованию и, в зависимости от выбранного метода, либо выполняют аспирацию одновременно с продвижением иглы к центру образования (если проводится аспирационная биопсия), либо вводят иглу в образование и фиксируют внутри неё столбик ткани (если проводится кор-биопсия).
Процесс получения ткани с помощью биопсийной игры на сегодняшний день является либо полуавтоматическим, либо автоматическим. При полуавтоматическом процессе продвижение желобка с иглой в патологический очаг производится вручную, а активизация канюли в игле, которая и захватывает ткань, происходит автоматически с помощью подпружиненного спускового механизма. В автоматическом варианте используется специальный биопсийный пистолет, и врачу требуется только поднести его к интересующей области.
Также возможно провести биопсию во время выполнения диагностического эндоскопического исследования, например, ЭГДС или бронхоскопии. В этом случае забор гистологического материала происходит практически безболезненно для пациента, хоть и причиняет определённый дискомфорт.
Кроме того, на гистологическое исследование будут направлены ткани, удалённые во время операции. Следует отметить, что в отдельных случаях операция может быть назначена как раз для получения гистологического материала (например, назначение раздельного диагностического выскабливания матки и цервикального канала с целью установить причину гинекологического заболевания).
Запись на консультацию круглосуточноВиды гистологического исследования
В первую очередь проводится собственно гистологическое исследование, то есть изучение специально подготовленной ткани, взятой при биопсии, под микроскопом. Процесс подготовки ткани для исследования включает несколько этапов.
- Кусочек ткани обезвоживают и пропитывают парафином, тем самым формируя небольшой кубик, в который и заключена ткань.
- Далее с парафинового кубика выполняют срезы микротомом, причём толщина срезов может достигать 3 микрометров.
- Срезы переносятся на стекло, подготавливаются к окрашиванию и окрашиваются одним из известных методов с целью облегчения определения и дифференцировки отдельных структур ткани при проведении исследования.
Таким образом, процесс подготовки ткани к гистологическому исследованию достаточно длительный, чем и объясняется получение заключения врача через несколько дней после биопсии. Однако в случае, когда требуется срочное исследование (например, оценка краёв резекции в ходе операции или же исследование сторожевого лимфоузла при раке молочной железы), процесс подготовки ткани может быть сокращён до получаса, однако в этом случае качество полученного гистологического препарата существенно ниже, поэтому после операции проводится тщательное изучение биоматериала в плановом порядке.
Описание процесса подготовки ткани к гистологическому исследованию неслучайно описано столь подробно, поскольку нередки ситуации, когда пациент хочет получить второе мнение или же продолжить лечение в другом учреждении. В этой ситуации целесообразно взять и готовые гистологические препараты («стёкла»), и, по возможности, парафиновые блоки, так как проводящий исследование патологоанатом может при необходимости дорезать несколько срезов с блока, применить иной вид гистологических красителей и провести дополнительные исследования на большем количестве биопсийного материала.
Какие исследования могут дополнять изучение срезов под микроскопом? В первую очередь это иммуногистохимическое исследование, позволяющее определить гистологическую принадлежность опухоли, что крайне важно, например, при исследовании метастаза из невыявленного первичного очага. В этом случае оценивается экспрессия различных генов и их белков в ткани. Также при раке молочной железы иммуногистохимическое исследование позволяет определить, есть ли у опухоли рецепторы к эстрогену и прогестерону, и, соответственно, назначить требуемое при выявленном молекулярном подтипе химиотерапевтическое лечение и гормонотерапию. Наконец, определение экспрессии белка Her2/neu позволяет заключить, показана ли больному раком молочной железы или раком желудка таргетная терапия.
Отдельно хотелось бы остановиться на цитологическом исследовании. В отличие от гистологического исследования, при котором предметом изучения являются ткани, при цитологическом анализе изучаются отдельные клетки на предмет патологических отклонений. Цитологическое исследование обладает меньшей точностью, нежели гистологическое, но позволяет дать заключение о природе заболевания в тех случаях, когда невозможно получить кусочек ткани (например, при анализе плеврального выпота — является ли он связанным с опухолевым поражением плевры или нет — или смывов с брюшины в случае подозрения на метастатические отсевы рака яичников).
Показания для проведения гистологического исследования
Гистологическое исследование — наиболее точный метод диагностики, к которому следует прибегать, когда все другие исследования в совокупности не могут однозначно указать на конкретный диагноз.
В первую очередь выполнение гистологического исследования показано пациентам с подозрением на злокачественное новообразование или с уже подтвержденным диагнозом «рак». В первом случае результат исследования даёт право врачу окончательно поставить диагноз. Во втором случае выполнение гистологического исследования показано, чтобы:
- отслеживать динамику, например, подтвердить отдаленное метастазирование;
- менять тактику лечения сообразно результатам, например, если больной раком молочной железы химиотерапия проводилась до операции, а результаты послеоперационного гистологического исследования не показали полного ответа опухолевых клеток на лечение, в отдельных случаях возможно назначить таблетированную химиотерапию в послеоперационном периоде.
Далее, гистологическое исследование показано в случае заболеваний, которые по своей сути являются доброкачественными, но обладают потенциалом к озлокачествлению. Таковыми являются, например, полипы кишечника; сами по себе они не несут угрозы для жизни, но потенциально могут переродиться в опухоль, поэтому полипы после удаления обязательно подлежат исследованию с целью определить, не появились ли в них опухолевые структуры.
Широкое применение гистологического исследования наблюдается и при неопухолевых заболеваниях. В гастроэнтерологии и гинекологии исследование тканей и клеток, помимо исключения опухолевого процесса, также предназначено для оценки воспалительных процессов и их динамики, выявления эндокринных нарушений. Большую роль гистологическое исследование имеет и при лечении аутоиммунных заболеваний, позволяя оценить степень активности патологического процесса и тяжесть поражения, а также ответ на проводимую терапию.
Наконец, гистологическое исследование, а, вернее, его подвид — цитологическое исследование — нашло своё место и в скрининге. Исследование мазка-отпечатка с шейки матки позволяет определить предраковое состояние или уже развивающуюся опухоль, и простота и эффективность данного метода позволила включить мазок в скрининг на рак шейки матки.
Следует отметить, что противопоказаний как таковых к проведению гистологического исследования нет, так как забор гистологического материала является малоинвазивной и хорошо переносимой процедурой. Возможные осложнения могут быть связаны с индивидуальной реакцией пациента на анестетики или же с нарушением свёртываемости крови. В любом случае пациенту назначается покой и холод на место проведения биопсии, анальгетики при болях.
Результат гистологического исследования
Результат гистологического исследования будет готов спустя несколько дней после выполнения биопсии, что связано с этапной подготовкой исследуемой ткани и изучением биоматериала врачом-патологоанатомом под микроскопом. Результатом может быть как короткое заключение с указанием установленного тканевого строения патологического образования (например, «инвазивный дольковый рак»), так и подробное описание всех изменений в строении ткани и составляющих её клеток.
Расшифровкой результатов гистологии должен заниматься лечащий врач, так как гистологическое исследование назначается именно им и с совершенно определенной целью. Полученное заключение по цитологическому или гистологическому исследованию поможет врачу в установке клинического диагноза и в подборе требуемых на данный момент методов лечения.
Читайте также: